yy.vip易游-一种Apabetalone水合物晶型及其制备方法与流程

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　　本发明属于医药结晶技术领域，具体涉及一种2-[4-(2-羟基乙氧基)-3，5-二甲基苯基]-5，7-二甲氧基喹唑啉-4(3h)-酮的水合物晶型及其制备方法。

　　apabetalone是由加拿大的雷斯韦洛吉克思公司(resverlogix)研发的一种溴结构域蛋白抑制剂(us8053440b2)，主要用于治疗心血管、2型糖尿病、冠心病、动脉粥样硬化等疾病。据统计，心血管疾病是当今世界上威胁人类生命最严重的疾病之一，其发病率和死亡率都很高。然而目前治疗心血管疾病类的药物尚不能满足人们的需求，需要不断开发新的药物。而新药apabetalone能够对bet家族中的brd4(全称为bromodomain-containingprotein4，即溴结构域蛋白4)区起到抑制作用，从而调节载脂蛋白a-1的表达和高密度脂蛋白的合成，对心血管疾病具有良好的治疗效果。

　　固体药物晶型不同，其理化性质会有显著的差异，比如溶解度、溶出速率、稳定性、流动性及机械性能等等，从而会影响到药物产品的质量及其最终药效，所以对于药物晶型的研究意义重大。经国内外专利与文献检索，目前只有一篇有关apabetalone的晶型专利(wo2018103726)，报道了其9种固体形态，但是这9种固体形态均存在一些问题与缺陷，限制了其生产及应用。其中，cs20为溶剂化合物，不适合药用。cs4需要通过加热cs11获得，加热温度较高(200-220℃)，能耗大，经济效益低，不适合开发。cs7通过气相扩散获得，由于气相扩散速度较慢，所以该过程出晶缓慢，不适合大批量的工业化生产，同样，通过室温缓慢挥发制备的晶型cs9、cs13与cs20由于蒸发速率的限制而使其不利于大批量的工业化生产。晶型cs8与cs1溶解度较低，影响药物在人体的吸收情况。而cs2与cs11虽然溶解度较高，但是其引湿性较差，稳定性不好，不利于药物的长期存储。在此基础上，本申请人经过大量实验研究，发现了一种溶解度高、稳定性好，且几乎没有引湿性、易于制备、适合开发的apabetalone水合物晶型，为该药物制剂的制备提供了新的选择，对于该种药物的开发具有重要意义。

　　在现有技术的基础上，本申请人经过大量的实验研究，提供了一种apabetalone水合物晶型及其制备方法。

　　本发明所述的apabetalone水合物的热失重tga图，见附图2，在75±5℃处开始失重，失重4.635％。根据失重计算，所得水合物为apabetalone一水合物。

　　本发明所述的apabetalone水合物的差式扫描量热dsc图，见附图3，在76±2℃处开始出现特征吸热峰，峰值为120℃±2，对应于脱溶剂过程，在221±2℃处有另一尖锐的吸热峰，为脱溶剂得到的无溶剂晶型的熔点。

　　本发明的apabetalone水合物晶型的晶体是采用两步恒温悬浮转晶法制备的，

　　(2)将步骤(1)溶剂化合物加入到水中，继续恒温悬浮,加入量为0.03-0.05g/ml水，悬浮温度为20-50℃，经过滤、干燥得到白色晶体，即为apabetalone水合物。

　　所述步骤(1)和(2)的干燥条件是温度在25-40℃，常压条件下干燥6h-24h。

　　所述步骤(2)中，在20-35℃悬浮时，悬浮时间为72-96h,在36-50℃悬浮时，悬浮时间为24-96h。

　　本发明方法采用恒温悬浮的方法，相比于其他工艺简洁，条件温和，重复性好，易于放大，适合工业生产；所得固体溶解性良好，在sgf(模拟人胃液)中，24小时溶解度高达0.652mg/ml,而专利wo2018103726中所述溶解度良好的产品cs2的溶解度为0.61g/l。高溶解度晶型有利于提高生物利用度，对药物开发具有重要意义。

　　所得产品稳定性好，易于储存。对所述apabetalone水合物的稳定性进行考察，将所述apabetalone水合物产品均匀分摊在敞口的培养皿中，密封置于干燥器内，控制温度在25℃，湿度为60％rh，在5天、10天时取样进行xrd检测，并与第0天的结果进行对照，具体图谱见图4所示，结果显示本申请所述的apabetalone水合物晶型未发生转变，稳定性较好。同时进行了加速稳定性实验，将药品置于40℃/75％rh环境中，在5天、10天时取样进行检测，与第0天对比，具体谱图如图4所示，结果显示apabetalone水合物稳定性良好，在加速稳定性条件下存在10天而未发生晶型及结晶度的变化。

　　另外，比较了所述apabetalone水合物与专利(wo2018103726)报道的晶型cs1及原研产品的相对稳定性。将所述apabetalone水合物分别与晶型cs1、原研晶型以1:1的投料比加入到水中，在50℃条件下悬浮24h,将所得产品分别进行xrd检测。所得产品的xrd图与图1相同，均为水合物，说明本发明所述水合物相对于专利晶型cs1、原研晶型具有更好的稳定性。在水中，所述水合物的稳定性要高于cs1及原料晶型，所以在水中悬浮的过程中，亚稳晶型会在水的介导下转化为稳定的水合物。这也为水合物的工业生产提供了一种途径，即通过所述步骤(1)(2)的方法制备一定量的水合物，然后以该水合物作为晶种，通过在水中悬浮的方法大量制备水合物，该过程所需溶剂为水，绿色环保，易于开发。

　　对本发明所得apabetalone水合物进行引湿性测试，在80％湿度下平衡后(平衡时间为30分钟)仅增重0.19％(如图5)(图中2条线，分别是水蒸气吸附曲线与脱附曲线)，根据引湿性增重的界定标准，属于几乎无引湿性。引湿性测试后测定产品xrd，如图6所示，发现测试前后晶型未改变，说明该水合物具有很好的湿度稳定性。良好的引湿性能够对抗药物生产或者运输存储过程中由于湿度变化所引起的晶型转化或潮解等问题，有利于药物的制剂加工及运输储存，节省储运成本。

　　图4本发明apabetalone水合物在25℃/60％rh和40℃/75％rh条件下的稳定性试验图谱比较，其中从下到上依此放置前、放置于25℃/60％rh条件下10天及放置于40℃/75％rh条件下10天的x-射线本发明apabetalone水合物的动态蒸汽吸附dvs图。

　　图6本发明apabetalone水合物引湿性测试前后产品的x-射线衍射图，从下到上依次为测试前、测试后的x-射线衍射图。

　　以下为所述apabetalone水合物(h)的具体实施方式实例，但不应该将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实施实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

　　方法：cu靶ka，电压40kv，电流100ma，测试角度2-40°，步长8，曝光时间0.2s，光管狭缝宽度1mm，探测器狭缝宽度2.7mm。

　　将0.06gapabetalone原料置于2ml的1,4-二氧六环溶剂中，在20℃下搅拌，进行悬浮结晶，24h后过滤，得到白色晶体，在25℃条件下干燥12h得到apabetalone的1，4-二氧六环溶剂化合物。

　　取0.03g得到的apabetalone溶剂化合物，置于1ml水中，在20℃下进行悬浮结晶，悬浮时间为72h,过滤得到白色晶体，在25℃下干燥24h得到apabetalone水合物的产品。

　　水合物产品的粉末x-射线、18.2、18.6、19.4、19.7、21.3、21.6、23.0±0.1、23.9、25.3、25.9、26.3度处有特征峰，与图1一致，tga图谱失重4.64％，与图2一致，dsc图谱在107和221℃处分别有特征吸热峰，与图3一致，证实所得产品为所述apabetalone水合物h晶体。所得晶体结晶度高，稳定性良好，加速稳定性测试条件下可稳定存在2周以上，几乎没有引湿性，在sgf中溶解度为0.65mg/ml。

　　将0.1gapabetalone原料置于2ml的1,4-二氧六环溶剂中，在50℃下搅拌，进行悬浮结晶，12h后过滤，得到白色晶体，在40℃条件下干燥6h得到apabetalone的1，4-二氧六环溶剂化合物。

　　取0.03g得到的apabetalone溶剂化合物，置于1ml水中，在20℃下进行悬浮结晶，悬浮时间为96h,过滤得到白色晶体，在25℃下干燥24h得到apabetalone水合物的产品。

　　水合物产品的粉末x-射线、18.2、18.6、19.4、19.7、21.3、21.6、23.0±0.1、23.9、25.3、25.9、26.3度处有特征峰，与图1一致，tga图谱失重4.65％，与图2一致，dsc图谱在106和222℃处分别有特征吸热峰，与图3一致，证实所得产品为所述apabetalone水合物h晶体。所得晶体稳定性良好，可长期储存，引湿性良好，在sgf中溶解度高，为0.64mg/ml。

　　将0.1gapabetalone置于2ml的1,4-二氧六环溶剂中，在30℃下搅拌，进行悬浮结晶，18h后过滤，得到白色晶体，在25℃条件下干燥12h得到apabetalone的1，4-二氧六环溶剂化合物。

　　取0.05g得到的apabetalone溶剂化合物，置于1ml水中，在50℃下进行悬浮结晶，悬浮时间为24h,过滤得到白色晶体，在30℃下干燥10h得到apabetalone水合物的产品。

　　水合物产品的粉末x-射线、18.2、18.6、19.4、19.7、21.3、21.6、23.0±0.1、23.9、25.3、25.9、26.3度处有特征峰，与图1一致，tga图谱失重4.64％，与图2一致，dsc图谱在107和222℃处分别有特征吸热峰，与图3一致，证实所得产品为所述apabetalone水合物h晶体。所得晶体结晶度高，稳定性良好，加速稳定性测试条件下可稳定存在2周以上，几乎没有引湿性，在sgf中溶解度高达0.65mg/ml。

　　将0.08gapabetalone置于2ml的1,4-二氧六环溶剂中，在40℃下搅拌，进行悬浮结晶，18h后过滤，得到白色晶体，在25℃条件下干燥12h得到apabetalone的1，4-二氧六环溶剂化合物。

　　取0.04g得到的apabetalone溶剂化合物，置于1ml水中，在40℃下进行悬浮结晶，悬浮时间为48h,过滤得到白色晶体，在25℃下干燥12h得到apabetalone水合物的产品。

　　水合物产品的粉末x-射线、18.2、18.6、19.4、19.7、21.3、21.6、23.0±0.1、23.9、25.3、25.9、26.3度处有特征峰，与图1一致，tga图谱失重4.64％，与图2一致，dsc图谱在108和222℃处分别有特征吸热峰，与图3一致，证实所得产品为所述apabetalone水合物h晶体。所得晶体稳定性良好，可长期储存，引湿性良好，在sgf中溶解度为0.63mg/ml。

　　将0.08gapabetalone置于2ml的1,4-二氧六环溶剂中，在30℃下搅拌，进行悬浮结晶，24h后过滤，得到白色晶体，在25℃条件下干燥10h得到apabetalone的1，4-二氧六环溶剂化合物。

　　取0.04g得到的apabetalone溶剂化合物，置于1ml水中，在35℃下进行悬浮结晶，悬浮时间为72h,过滤得到白色晶体，在40℃下干燥6h得到apabetalone水合物的产品。

　　水合物产品的粉末x-射线、18.2、18.6、19.4、19.7、21.3、21.6、23.0±0.1、23.9、25.3、25.9、26.3度处有特征峰，与图1一致，tga图谱失重4.64％，与图2一致，dsc图谱在109和221℃处分别有特征吸热峰，与图3一致，证实所得产品为所述apabetalone水合物h晶体。所得晶体稳定性良好，可长期储存，引湿性良好，在sgf中溶解度为0.65mg/ml。

　　将0.08gapabetalone置于2ml的1,4-二氧六环溶剂中，在30℃下搅拌，进行悬浮结晶，12h后过滤，得到白色晶体，在25℃条件下干燥10h得到apabetalone的1，4-二氧六环溶剂化合物。

　　取0.045g得到的apabetalone溶剂化合物，置于1ml水中，在50℃下进行悬浮结晶，悬浮时间为96h,过滤得到白色晶体，在30℃下干燥10h得到apabetalone水合物的产品。

　　水合物产品的粉末x-射线、18.2、18.6、19.4、19.7、21.3、21.6、23.0±0.1、23.9、25.3、25.9、26.3度处有特征峰，与图1一致，tga图谱失重4.63％，与图2一致，dsc图谱在108和221℃处分别有特征吸热峰，与图3一致，证实所得产品为所述apabetalone水合物h晶体。所得晶体稳定性良好，加速稳定性测试条件下可稳定存在2周以上，引湿性良好，在sgf中溶解度为0.65mg/ml。

　　将0.08gapabetalone置于2ml的1,4-二氧六环溶剂中，在30℃下搅拌，进行悬浮结晶，12h后过滤，得到白色晶体，在25℃条件下干燥10h得到apabetalone的1，4-二氧六环溶剂化合物。

　　取0.045g得到的apabetalone溶剂化合物，置于1ml水中，在40℃下进行悬浮结晶，悬浮时间为84h,过滤得到白色晶体，在30℃下干燥10h得到apabetalone水合物的产品。

　　水合物产品的粉末x-射线、18.2、18.6、19.4、19.7、21.3、21.6、23.0±0.1、23.9、25.3、25.9、26.3度处有特征峰，与图1一致，tga图谱失重4.63％，与图2一致，dsc图谱在108和221℃处分别有特征吸热峰，与图3一致，证实所得产品为所述apabetalone水合物h晶体。所得晶体稳定性良好，加速稳定性测试条件下可稳定存在2周以上，引湿性良好，在sgf中溶解度为0.65mg/ml。

　　将0.08gapabetalone置于2ml的1,4-二氧六环溶剂中，在30℃下搅拌，进行悬浮结晶，12h后过滤，得到白色晶体，在25℃条件下干燥10h得到apabetalone的1，4-二氧六环溶剂化合物。

　　取0.04g得到的apabetalone溶剂化合物，置于1ml水中，在36℃下进行悬浮结晶，悬浮时间为24h,过滤得到白色晶体，在30℃下干燥10h得到apabetalone水合物的产品。

　　水合物产品的粉末x-射线、18.2、18.6、19.4、19.7、21.3、21.6、23.0±0.1、23.9、25.3、25.9、26.3度处有特征峰，与图1一致，tga图谱失重4.63％，与图2一致，dsc图谱在108和221℃处分别有特征吸热峰，与图3一致，证实所得产品为所述apabetalone水合物h晶体。所得晶体稳定性良好，加速稳定性测试条件下可稳定存在2周以上，引湿性良好，在sgf中溶解度为0.65mg/ml。

　　本发明提出了一种apabetalone水合物晶型及其制备方法；已通过现场较佳实施例进行了描述，相关技术人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法进行改动或适当变更与组合，来实现本发明技术。特别需要指出的是，所有相类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，他们都被视为包括在本发明精神、范围和内容中。

　　技术研发人员：龚俊波;刘裕;黄嘉骏;吴送姑;张旭;侯宝红;汤伟伟;尹秋响

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